Inülinden Fruktooligosakkarit Üretimi için Aspergillus Niger Inülinazının Karboksillenmis Çok Duvarlı Karbon Nano Tüpler ile Kovalent Immobilizasyonu
[ X ]
Tarih
2021
Yazarlar
Dergi Başlığı
Dergi ISSN
Cilt Başlığı
Yayıncı
Erişim Hakkı
info:eu-repo/semantics/openAccess
Özet
Bu projenin konusu, inülinden fruktooligosakkarit (FOS) üretiminde kullanmak için Aspergillus niger inülinaz (ANI) enzimini karboksillenmis çok duvarlı karbon nano tüpler (c-MWCNT) üzerine kovalent baglama yöntemi ile immobilize etmekti. ANI çapraz baglayıcı reaktif glutardialdehit aracılıgıyla c-MWCNT üzerine kovalent baglama yöntemiyle % 100 baglanma verimi ve % 82.6 aktvite verimi ile immobilize edildi. Serbest ve immobilize ANI karakterize edilerek optimum pH, optimum sıcaklık, pH kararlılıgı, ısıl kararlılıgı ve Michaelis-Menten Sabitleri (Km ve Vmax) tayin edildi. Immobilizasyon enzimin optimum pH aralıgını (5.5-6.5) ve optimum sıcaklık aralıgını (55-65 oC) degistirmezken, enzimin pH ve ısıl kararlılıgını artırdı. Immobilize enzimin düsük ve yüksek pH aralıklarında serbest enzime göre daha yüksek aktiviteye ve kararlılıga sahip oldugu görüldü. Immobilizsyon enzimin maksimum hızını ve substrat olarak inüline ilgisini azaltmıstır. Serbest ve immobilize enzimler için elde edilen maksimum hız (Vmax) sırasıyla 3508.8 g/L.dk ve 2890.2 g/L.dk iken ve Km sabiti sırasıyla 662.3 g/L ve 699.3 g/L olarak tayin edildi. Km arttıkça enzimin substrata olan ilgisi azalmaktadır. Immobilize enzim optimum aktivite kosullarında baslangıçtaki aktivitesini pes pese 30 kullanım boyunca korudu. Immobilize enzim optimum depolama kosullarında (bir sonraki kullanıma kadar buzdolabında +4 oC?de 0.1 M?lık ve pH?sı 6.0 olan sodyum fosfat tampunu çözeltisinde depolandı) 20 gün boyunca baslangıçtaki aktivitesini korudu. Immobilize enzim kullanılarak 600 g/L inülin çözeltisinden % 91.15 dönüsüm oranıyla 546.9 g/L derisiminde FOS surubu elde edildi. Sonuç olarak, bu çalısmada elde edilen immobilize enzimin endüstriyel olarak inülinden FOS üretiminde kullanılabilecegi söylenebilir.
Açıklama
01.06.2021
Anahtar Kelimeler
Fruktooligosakkarit, enzim, inülin, kovalent immobilizasyon, aspergillus niger, inulinaz
